联系电话

025-52108425

Construction and screening of shRNA vector
shRNA载体构建及筛选

实验原理

早期的shRNA载体多采用RNA聚合酶III型启动子介导shRNA的表达,RNA聚合酶III型启动子如鼠源的U6启动子和人源的H1启动子可以在哺乳动物细胞中表达小分子RNA。随着miRNA干扰机制的深入研究,发展出第二代siRNA载体,即采用RNA聚合酶II型启动子CMV表达含侧翼序列的miRNA模拟物(见图2.2)。该载体模拟miRNA的加工,表达出来的shRNA进入RISC沉默复合物的效率要比RNA聚合酶III型启动子表达的shRNA高倍十倍,抑制效率更好,且可以和EGP协调表达,方便观察转染效率。


实验流程

图片23-shRNA载体构建及筛选.png


结果展示

图片22-siRNA的细胞转染及筛选.png

国内论文咨询 SCI服务 课题专题 数据分析服务 实验咨询 专利申请